تسجيل الدخول

تسجيل

يكشف لنا الرحلان الكهربائي على عديد الأكريلاميد وجود الملوثات

المؤلف:  د. روبرت موراي وآخرون

المصدر:  هاربرز في الكيمياء الحيوية

الجزء والصفحة:  ص 236

3-6-2021

2615

يكشف لنا الرحلان الكهربي على عديد الأكريلاميد وجود الملوثات

إن أفضل طريقة لتحديد تجانس البروتينات هي الرحلان الكهربي على هلامة عديد الأكريلاميد (PAGE) تحت ظروف مختلفة أكثرها شيوعا هو وجود سلفات دوديسيل الصوديوم (SDS). هذا الأخير هو عبارة عن مطهر أيوني يفصل البروتينات عديدة المواحيد إلى وحيداتها. وبما أن كل رابطة ببتيدية ترتبط تقريباً بجزيئين من SDS، فإن عديد الببتيد يصبح حاملا لشحنة سلبية قوية. هذا يجعل المسافة التي يقطعها عديد الببتيد باتجاه المصعد (Anode) خلال الرحلان متعلقة فقط بكتلته الجزيئية النسبية (Mr). ومن الطرق الأخرى تطبيق تقنية PAGE في ظروفه الأصلية (دون وجود SDS أو أي من الممسخات الاخرى). هذه الظروف تسمح بالحفاظ على البنية الرابعية أحيانا النشاط التحفيزي للإنزيم أيضاً.

وفي تقنية ال PAGE ثنائية البعد (O'Farrell)، يفصل البعد. الأول البروتينات المتمسخة على أساس قيم بايائها (PI) عن طريق موازنتها في الحقل الكهربي الحاوي على مدروج اليوريا والباهاء (pH) المصان بواسطة بلمرات الكهارل المذبذبة (Polymerized ampholytes)؛ بعد ذلك يقوم البعد الثاني بفصل البروتينات، بعد معالجتها بـ SDS، على أساس الحجم الجزيئي لوحيداتها البروتيتية.